基于肝星状细胞自噬和凋亡探讨莪术醇抗肝纤维化的作用机制

• 作者: 郑洋 徐灿丽 卢能源 邱菲菲 赵颖杰 常玉线 王佳慧 赵铁建 原鲜玲
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 莪术醇 肝纤维化 肝星状细胞 自噬 凋亡
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 730-736
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20210930.401

摘要

基于莪术醇对肝星状细胞自噬和凋亡的影响作用,希冀阐明其抗肝纤维化作用的分子机制.将肝星状细胞分为5组,对照组、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)10 ng·mL-1组、莪术醇不同浓度(12.5、25、50 mg·L-1)组.使用MTT试剂盒检测莪术醇对TGF-β1诱导肝星状细胞活力的影响;借助细胞流式检测各组细胞凋亡发生情况;实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-PCR)检测各组α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ型(collagen Ⅰ)、胶原蛋白Ⅲ型(collagenⅢ)mRNA表达情况;Western blot检测各组p62、微管相关蛋白轻链3(microtu-bule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、beclin1、B细胞淋巴瘤2(B cell lymphoma 2,Bcl-2)、B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(B-cell lymphoma 2 related X protein,Bax)表达情况;透射电镜观察各组细胞形态和自噬小体形成情况;双荧光标记腺病毒感染细胞后,观察各组细胞自噬流发生情况.细胞活力检测实验发现,与TGF-β1组相比,莪术醇各组细胞活力显著下降.细胞凋亡实验发现,莪术醇各组较TGF-β1组细胞凋亡率显著增加.实时荧光定量PCR实验发现,莪术醇各组α-SMA、collagen Ⅰ、collagenⅢ mRNA表达较TGF-β1组显著下降.Western blot实验发现,莪术醇各组p62、LC3、beclin1、Bcl-2、Bax表达较TGF-β1组具有明显差异.透射电镜发现莪术醇各组自噬小体数量较TGF-β1组显著增加.双荧光标记腺病毒检测自噬流发现莪术醇各组自噬溶酶体数量较TGF-β1组显著增加.莪术醇可以诱导肝星状细胞自噬和凋亡,可能是其抗肝纤维化的作用机制之一.