犬瘟热病毒Vero细胞悬浮产业化培养工艺研究

• 作者: 郑新勇 闫福海
• 来源期刊: 现代畜牧兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 犬瘟热 Vero细胞 反应器 悬浮培养
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 疾病防治|Epidemic Prevention
• 页码范围: 57-60
• 页数: 4页
• 分类号: S858.292
• 语种: 中文

摘要

为克服犬瘟热疫苗现有生产工艺的缺陷,试验采用10g/L Cytodex-1型微载体,按每个微载体15～20个细胞的细胞接种量接种至微载体培养Vero细胞,细胞培养液为10％NBS的DMEM培养液.结果显示,当细胞密度达到8×106 CFU/mL时接种犬瘟热病毒,最佳培养时间30 h,接毒剂量按照MOI为0.1接种犬瘟热病毒液;当细胞病变达到50％时,病毒感染细胞时间为30 h,收获毒液.按照上述摸索生产工艺参数,收获的犬瘟热病毒液的病毒液滴度每病毒含量≥108.5TCID50/0.1 mL.将收获的病毒液冻存及下游相关的灭活处理,作为制备犬瘟热疫苗的抗原.研究表明,试验大幅度提升犬瘟热病毒培养量,效价批间差异性均一,实现了产业化反应器悬浮培养代替细胞工厂的技术路线.