miR-495-3p对山羊卵巢颗粒细胞功能的影响

• 作者: 王磊 何莉娜 唐雪 李碧筠 黄思艺 王钰锟 徐德军 赵中权
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: miR-495-3p 山羊卵巢颗粒细胞 凋亡 类固醇激素
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术与繁殖|ANIMAL BIOTECHNOLOGY AND REPRODUCTION
• 页码范围: 436-446
• 页数: 11页
• 分类号: S827.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2022.02.011

摘要

旨在探究miR-495-3p对山羊卵巢颗粒细胞功能的影响及作用机制.本研究选取健康的3～4月龄大足黑山羊母羊,收集卵巢颗粒细胞,利用miR-495-3p模拟物(mimics)和抑制物(inhibitor)构建过表达和抑制模型,通过流式细胞术检测细胞凋亡和周期,ELISA分析颗粒细胞的雌二醇(E2)和孕酮(P4)分泌,采用qRT-RCR、Western blot检测细胞凋亡、增殖、周期及类固醇激素合成相关基因的mRNA和蛋白的表达水平.结果 显示,miR-495-3p显著促进卵巢颗粒细胞凋亡(P＜0.01),并且促进BAX表达(P＜0.05),抑制BCL2表达(P＜0.01);过表达miR-495-3p呈时间依赖性抑制细胞增殖活力,显著降低PCNA的表达(P＜0.05);过表达miR-495-3p显著增加G2/M期细胞百分比(P＜0.05),并显著降低细胞周期相关基因CDK4(P＜0.001)和CCND1(P＜0.05)的mRNA水平,抑制miR-495-3p极显著降低CCNE1的mRNA水平(P＜0.01);miR-495-3p促进颗粒细胞E2和P4分泌;过表达miR-495-3p显著提高3β-HSD(P＜0.001)、CYP11A1(P＜0.01)、CYP19A1(P＜0.05)的mRNA和蛋白表达水平,干扰miR-495-3p极显著抑制3β-HSD(P＜0.01)、促进CYP11A1的表达(P＜0.01).上述结果表明,miR-495-3p促进颗粒细胞凋亡,抑制增殖,将细胞周期阻滞在G2/M期,刺激类固醇激素分泌,从而影响山羊卵泡的发育.