基于环介导等温扩增联合表面增强拉曼光谱检测巨细胞病毒的研究

• 作者: 关鑫 武毅 徐冰 金正洋 梁重阳
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 巨细胞病毒 环介导等温扩增 表面增强拉曼光谱 4-巯基苯甲酸
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告|Review and Progress
• 页码范围: 424-432,中插3-中插4
• 页数: 1页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19756/j.issn.0253-3820.221007

摘要

巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)对器官移植患者、产妇及新生儿等免疫功能失调人群的危害极大.目前,临床检测CMV的主要方法为荧光定量PCR法(Quantitative polymerase chain reaction,qPCR),但其检测成本高,仪器操作复杂,不适于现场快速检测.环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种超灵敏且简单快速的核酸检测技术,其扩增效率优于qPCR,但其引物间易产生二聚体,导致非特异性扩增,从而出现假阳性结果.本研究针对LAMP扩增产物中的DNA单链环状结构,设计了两段序列互补的探针,分别连接磁珠(Magnetic beads,MNs)和修饰有拉曼探针信号分子4-巯基苯甲酸(4-Mercaptobenzoic acid,4-MBA)的银纳米粒子(Sliver nanoparticles,AgNPs),二者与环状结构结合,形成MNs-LAMP产物-AgNPs复合物.通过磁场富集此复合物,表面增强拉曼散射(Surface enhanced Raman scattering,SERS)光谱监测结果表明,复合物的SERS信号更强.采用本方法检测了CMV标准核酸序列,检出限低至1000 copies/mL.本研究在扩增产物结构原理层面上解决了LAMP技术可能出现假阳性结果的问题,对研发新型快速核酸检测技术具有参考价值.