青蒿素衍生物DHA/ARTS诱导肾癌细胞系786-0发生铁死亡的机制

• 作者: 黄成丽 林芳荣 李根 王忠玲 王雪娇
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 医学
• 关键词: 双氢青蒿素 青蒿琥酯 铁死亡 NCOA4 FTH1
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究|Basic Medical Research
• 页码范围: 178-184
• 页数: 7页
• 分类号: R737.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2022.02.005

摘要

目的 探讨双氢青蒿素(DHA)/青蒿琥酯(ARTS)诱导肾癌细胞系786-0发生铁死亡的机制.方法 将DHA/ARTS刺激肾癌细胞系786-0,确定DHA/ARTS所诱导的肾癌细胞死亡即为铁死亡;利用RT-qPCR、Western blot等实验技术,观察NCOA4和FTH1在DHA/ARTS作用后的变化;两种不同siRNA敲减NCOA4后,观察DHA/ARTS对786-0作用的变化;构建pmCherry-EGFP-FTH1质粒和荧光显色,过表达该质粒,观察DHA/ARTS作用后荧光颜色及亮度变化,判断FTH1的自噬降解情况;敲减NCOA4后再转染pmCherry-GFP-FTH1质粒,检测DHA/ARTS作用后荧光颜色及亮度变化,探索NCOA4调节FTH1的自噬降解.结果 786-0细胞系在DHA和ARTS作用后,从显微镜观察和CCK-8检测,显示细胞发生了明显死亡,并且随着药物浓度的增大存活细胞数越少.而且由DHA和ARTS所产生的致死作用可以被铁死亡抑制剂DFO和Fer-1所抑制.DHA和ARTS作用下786-0细胞内ROS的荧光强度明显高于对照组,差异有统计学意义(q=2.894,2.342;P＜0.05).在铁死亡抑制剂DFO和Fer-1干预下,DHA+DFO组、DHA+ Fer-1组、ARTS+DFO组、ARTS+ Fer-1组786-0细胞内ROS的荧光强度明显低于DHA组和ARTS组(P＜0.05).从自噬结果来看,DHA组和ARTS组的细胞自噬率明显高于对照组(P＜0.05),并且50μM的DHA和ARTS组细胞的自噬率明显高于20 μM的DHA和ARTS组(P＜0.05).在siRNA-NCOA4沉默NCOA4表达后,细胞自噬率明显降低(P＜0.05).结论 青蒿素衍生物DHA和ARTS可诱导786-0肾癌细胞系发生铁死亡,其致铁死亡的发生是通过NCOA4介导FTH1特异性自噬降解而实现的.