犬源牛犬细小病毒和犬圆环病毒二联PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 于永乐 姚延珠 韩先杰 张传美 秦志华 杨瑞梅 张洪亮 刘维全 单虎
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 犬源牛犬细小病毒 犬圆环病毒 二联PCR
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报|RESEARCH NOTES
• 页码范围: 978-982
• 页数: 5页
• 分类号: S852.655
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2022.03.031

摘要

本研究旨在建立可同时检测犬源牛犬细小病毒(CBoV)和犬圆环病毒(CCV)的二联PCR检测方法,并对两种病毒病当前的流行情况进行监测和调查.分别将已发表的CBoV和CCV基因组序列进行同源性比对,选择高同源区段,应用Primer Primier 5计算机软件设计并合成了2对特异性扩增引物,目的片段大小分别为170 bp(CBoV)和239 bp(CCV).分别提取CBoV和CCV重组质粒作为模板,进行二联PCR扩增试验.结果表明,本研究成功建立了可同时检测CBoV和CCV的二联PCR检测方法.并对其重复性、特异性和灵敏度进行验证,二联PCR最低检测限度为3.0 pg总DNA,而对犬细小病毒2型、犬瘟热病毒和犬副流感病毒的PCR检测结果均为阴性.对送检的30份病料进行检测,其中,4份为CBoV阳性,3份为CCV阳性,未检测到混合感染.综上所述,本研究所建立的CBoV和CCV二联PCR诊断方法特异性高,敏感性好,可用于临床犬腹泻病的流行病学调查.