小白菊内酯对骨肉瘤细胞凋亡与凋亡相关蛋白的影响及作用机制研究

• 作者: 纪涛 任建政 李正华 陈小龙
• 来源期刊: 陕西医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小白菊内酯 骨肉瘤细胞 凋亡 流式细胞法 细胞活性 凋亡相关蛋白
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 151-154,163
• 页数: 5页
• 分类号: R783.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7377.2022.02.005

摘要

目的:探讨小白菊内酯(PTL)对骨肉瘤细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响及作用机制.方法:CCK-8实验检测并筛选出PTL抑制骨肉瘤细胞活性的有效作用浓度,再通过流式细胞法检测PTL促进骨肉瘤细胞发生凋亡的有效作用浓度,最终确定出用于后续实验的有效PTL浓度,实时荧光定量PCR法和Western blot法从分子水平检测PTL对骨肉瘤细胞凋亡及相关凋亡蛋白表达的影响.结果:CCK-8实验结果表明,PTL浓度为5、10μmol/L时,对骨肉瘤细胞活力和凋亡均无显著影响.而PTL浓度为20、40μmol/L时,显著抑制骨肉瘤细胞活性(均P<0.05),PTL浓度为20、40μmol/L时,显著促进骨肉瘤细胞发生凋亡,且20、40μmol/L PTL两组间比较差异无统计学意义(均P>0.05).故选择20μmol/L PTL用于后续实验,细胞爬片及TUNEL实验证实PTL(20μmol/L)显著促进骨肉瘤细胞凋亡(P<0.05),实时荧光定量PCR法和Western blot法表明PTL显著促进骨肉瘤细胞Bax mRNA和蛋白表达上调,Cleaved-Caspase 3/Caspase 3比值上调,并抑制Bcl-2 mRNA和蛋白表达(均P<0.05).结论:PTL通过上调Bax表达及Cleaved-Caspase 3/Caspase 3比值,并抑制Bcl-2表达,进而体外诱导骨肉瘤细胞发生凋亡.