转录因子叉头框蛋白O3a对前列腺癌细胞上皮间质转化的影响

• 作者: 夏明亮 任川川 李云龙 朱海松 张超 李军
• 来源期刊: 安徽医药
• 关键词: 前列腺肿瘤 上皮间质转化 转录因子叉头框蛋白O3a Wnt/β-catenin信号通路
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 临床医学|Clinical Medicine
• 页码范围: 297-303
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-6469.2022.02.022

摘要

目的 探讨转录因子叉头框蛋白O3a(FOXO3a)对前列腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响及其作用机制.方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测正常前列腺上皮细胞RWPE-1和前列腺癌细胞LNCaP、DUl45、PC-3中FOXO3a表达水平,选择FOXO3a表达最低的前列腺癌细胞系转染pcDNA-FOXO3a、pcDNA-NC构建FOXO3a过表达细胞系(pc-FOXO3a)和阴性对照(NC),采用MTT法、流式细胞法检测细胞活性和凋亡情况,Transwell试验、划痕试验检测细胞侵袭和迁移能力,蛋白质印迹法(Western blotting)检测钙黏附蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)、Snail、c-Myc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、剪切型胱天蛋白酶-3(Cleaved-Cas-3)、Bcl-2相关X(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、β-连环蛋白(β-catenin)、Wnt1水平.运用氯化锂(Wnt/β-catenin信号通路激活剂)作用于pcDNA-FOXO3a前列腺细胞,分析细胞活性、凋亡和上皮间质转换(EMT)情况.结果 LNCaP、DUl45、PC-3细胞中FOXO3a表达水平均显著低于RWPE-1细胞[(0.23±0.04)、(0.53±0.05)、(0.42±0.06)比(1.02±0.08)](P<0.05),其中LNCaP细胞中FOXO3a表达水平最低.pc-FOXO3a LNCaP细胞活性、单个视野细胞侵袭数目、划痕迁移率显著低于NC LNCaP细胞(P<0.05),细胞凋亡率显著高于NC LNCaP细胞(P<0.05);pc-FOXO3a LNCaP细胞N-cadherin、Vimentin、Snail、β-catenin、c-Myc、cyclin D1、Bcl-2、Wnt1水平显著低于NC LNCaP细胞(P<0.05),而E-cadherin、Cleaved-Cas-3、Bax水平显著高于NC LNCaP细胞(P<0.05).LiCl-pc-FOXO3a LNCaP细胞活性、单个视野细胞侵袭数目、划痕迁移率、N-cadherin、Vimentin、Snail水平显著高于LiCl-pc-FOXO3a-Ctrl LNCaP细胞(P<0.05),细胞凋亡率、E-cadherin水平显著低于LiCl-pc-FOXO3a-Ctrl LNCaP细胞(P<0.05).结论 FOXO3a表达升高可降低前列腺癌细胞活性、促进细胞凋亡,抑制细胞EMT,可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关.