多聚磷酸盐促进肌腱干细胞增殖和能量代谢的体外研究

• 作者: 雷昌斌 唐新文 郭志文 李健
• 来源期刊: 中国矫形外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肌腱干细胞 多聚磷酸盐 细胞增殖 能量代谢 Ⅰ型胶原
• 年，卷（期）: 2022,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 533-538
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 语种: 中文
• DOI: 10.3977/j.issn.1005-8478.2022.06.11

摘要

[目的]探讨多聚磷酸盐(inorganic polyphosphate,Poly P)对体外肌腱干细胞增殖和能量代谢的影响.[方法]分离培养大鼠肌腱干细胞,采用流式细胞术对其表面分子进行鉴定,然后用0、0.5、1.0mmol/L的Poly P处理大鼠肌腱干细胞,行CKK-8、细胞周期实验和ATP能量检测,采用蛋白免疫印迹(Western blot)和免疫荧光检测Ⅰ型胶原的表达.[结果]流式细胞分析表明＞95％的分离细胞均表达CD44和CD90.1,几乎不表达CD45和CD106.CKK-8检测表明:随着培养时间的推移,三个浓度PolyP组的OD值均显著增加(P＜0.05),培养4～24h,OD值呈浓度依赖性增加,三组间差异均有统计学意义(P＜0.05).流式细胞检测表明,Poly P呈浓度依赖性提高细胞G2+S期的百分比,差异有统计学意义(P＜0.05).ATP检测方面,随培养时间的推移,三个浓度Poly P组的ATP检测的标准值均显著增加(P＜0.05).Poly P可以促进大鼠肌腱干细胞的ATP合成,且呈浓度依赖性,培养4～24h,三组间ATP检测的比值差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光染色方面,可见随Poly P的增加,Ⅰ型胶原的荧光显色强度显著增加.Western blot检测表明0.5、1.0mmol/L的PolyP组比较0mmol/LPolyP组的Ⅰ型胶原的表达显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]在体外Poly P可以上调大鼠肌腱干细胞基质合成基因Ⅰ型胶原的表达和ATP的生成,促进肌腱干细胞的增殖.