腺病毒介导骨形态发生蛋白2诱导兔骨髓间充质干细胞的成骨分化

• 作者: 武成聪 王芳 万建杉 吴铮 孙嵘 黄合飞 钱选昆 欧华 任静
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白2 成骨 Wnt信号通路
• 年，卷（期）: 2022,（30）
• 所属期刊栏目: 骨髓干细胞|Bone marrow stem cells
• 页码范围: 4757-4761
• 页数: 5页
• 分类号: R459.9|R318|Q813
• 语种: 中文

摘要

背景:天然骨形态发生蛋白2在体内无法实现缓释、持续诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,如何获得内源性骨形态发生蛋白2蛋白是目前研究的热点.目的:探讨腺病毒介导人骨形态发生蛋白2转染兔骨髓间充质干细胞的成骨分化能力及其可能机制.方法:采用腺病毒介导人骨形态发生蛋白2基因转染第3代兔骨髓间充质干细胞,转染后48 h采用qRT-PCR、Western blot检测骨髓间充质干细胞中骨形态发生蛋白2的mRNA和蛋白表达,利用Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平.然后进行成骨诱导培养,第7天检测碱性磷酸酶活性,第14天采用免疫组织化学染色方法观察Ⅰ型胶原蛋白表达,第21天采用茜素红S染色观察钙结节形成情况.结果 与结论:①Ad-BMP2-EGFP转染后骨髓间充质干细胞中骨形态发生蛋白2 mRNA和蛋白的表达明显上调;②Ad-BMP2-EGFP转染的骨髓间充质干细胞成骨诱导后碱性磷酸酶活性增强,Ⅰ型胶原蛋白分泌以及钙结节形成增多;β-catenin、cyclin D1、Runx2和c-myc蛋白表达上调,而GSK3β蛋白表达下调;③结果 表明,Ad-BMP2-EGFP转染促进了骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,其作用机制可能是通过上调骨形态发生蛋白2蛋白表达水平从而激活Wnt/β-catenin信号通路来实现的.