人脐带间充质干细胞向肝细胞分化过程中长链非编码RNA核富集转录本1的作用

• 作者: 王丹丹 禹亚彬 刘世奇 严雨楼 张建淮
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 长链非编码RNA NEAT1 间充质干细胞 肝细胞 分化 肝细胞特异性基因 转染
• 年，卷（期）: 2022,（30）
• 所属期刊栏目: 脐带脐血干细胞|Umbilical cord and umbilical cord blood stem cells
• 页码范围: 4847-4851
• 页数: 5页
• 分类号: R459.9|R329|R575
• 语种: 中文

摘要

背景:人脐带间充质干细胞在体外借助细胞因子可以诱导分化为肝样细胞,但是形成的肝样细胞功能上尚不够成熟.研究发现长链非编码RNA与细胞分化关系密切,并通过干预某些长链非编码RNA的表达达到了促进细胞分化的目的.目的:探讨长链非编码RNA核富集转录本1对人脐带间充质干细胞向肝细胞分化的影响.方法:建立人脐带间充质干细胞向肝细胞分化体系,用糖原染色和吲哚菁绿摄取实验评价肝细胞功能特性,qRT-PCR检测肝细胞特异性基因及核富集转录本1的mRNA表达.然后通过构建慢病毒干扰核富集转录本1表达,转染7 d后得到稳定转染的细胞株,然后进行肝向诱导分化4周,设立转染空质粒的阴性对照组,未进行病毒转染的对照组,qRT-PCR、Western blot检测肝细胞特异性基因和蛋白表达.结果 与结论:①经糖原染色后可见细胞胞质内有红、紫色糖原颗粒,吲哚菁绿摄取后可见大量深绿色吲哚菁绿阳性细胞;②随着诱导时间延长,白蛋白、细胞色素酶P4503A4 mRNA表达量逐渐增加,核富集转录本1的mRNA表达量逐渐降低;③与阴性对照组和未转染对照组比较,在干扰核富集转录本1表达后,白蛋白、细胞色素酶P4503A4 mRNA和蛋白表达均明显增加;④结果表明,长链非编码RNA核富集转录本1可能参与了人脐带间充质干细胞向肝细胞的分化.