三羟乙基芦丁对大鼠颈脊髓损伤的抗氧化应激作用

• 作者: 刘雅普 苏圆圆 刘祺 杨舟 李榕 黄祖成 黄志平 吴晓亮 朱青安
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 三羟乙基芦丁 颈脊髓损伤 大鼠 氧化应激 STAT3
• 年，卷（期）: 2022,（36）
• 所属期刊栏目: 骨科植入物相关基础实践|Basic experiment of orthopedic implant
• 页码范围: 5868-5874
• 页数: 7页
• 分类号: R459.9|R496|R318
• 语种: 中文

摘要

背景:既往动物实验研究发现三羟乙基芦丁可改善颈脊髓损伤大鼠的神经功能,但缺乏其作用机制的相关研究.目的:通过体内体外实验研究三羟乙基芦丁对颈脊髓损伤的抗氧化应激作用,并对其可能机制进行初步探讨.方法:①细胞实验:大鼠肾上腺PC12细胞购于美国模式菌种收集中心(ATCC)细胞库.MTT法检测梯度浓度(0,25,75,100,150,200,250μmol/L)叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide,TBHP)、梯度浓度三羟乙基芦丁(0,50,100,200,400μmol/L)对PC12细胞活性的影响,确定TBHP和三羟乙基芦丁的实验浓度.②动物实验:将雄性SD大鼠分为假手术组、损伤组、三羟乙基芦丁50 mg/kg组、三羟乙基芦丁100 mg/kg组、STAT3抑制剂组,每组12只.除假手术组外行大鼠颈脊髓损伤,三羟乙基芦丁50 mg/kg组和100 mg/kg组损伤造模后分别予以腹腔注射三羟乙基芦丁50 mg/kg(1次/d)和100 mg/kg(1次/d);抑制剂组在损伤造模后给予STAT3抑制剂2000μg/kg(1次/d);假手术组动物行椎板切除术,但未行挫伤打击操作.假手术组和损伤组大鼠予以腹腔注射生理盐水,连续注射3 d.采用DCFH荧光探针检测三羟乙基芦丁对TBHP刺激PC12细胞中活性氧合成的影响;采用Western blot方法检测三羟乙基芦丁和STAT3抑制剂对PC12细胞及颈脊髓损伤组织中氧化应激相关蛋白Catalase和锰超氧化物歧化酶表达水平的影响;免疫荧光染色检测三羟乙基芦丁对颈脊髓损伤组织中STAT3和锰超氧化物歧化酶蛋白表达的影响.结果 与结论:①三羟乙基芦丁可显著降低由TBHP诱导的PC12细胞内活性氧形成(P<0.05);②三羟乙基芦丁和STAT3抑制剂可显著上调PC12细胞和颈脊髓损伤组织内的Catalase蛋白和锰超氧化物歧化酶蛋白的表达量(P<0.05),同时显著抑制STAT3和NCK1蛋白表达量(P<0.05);③三羟乙基芦丁具有抗氧化应激作用,可降低脊髓损伤后氧化应激的破坏作用,其机制可能是通过调节STAT3的表达起效.