厚鳞柯叶水提物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌机理

• 作者: 罗泽萍 潘立卫 姚东梅
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA） 厚鳞柯叶水提物（AELL） 最小抑菌浓度（MIC） 最小杀菌浓度（MBC） 抑菌机理
• 年，卷（期）: 2023,（8）
• 所属期刊栏目: 优秀青年学者论坛
• 页码范围: 2088-2098
• 页数: 10页
• 分类号: S853.74
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2022.08.002

摘要

【目的】明确厚鳞柯叶水提物（Aqueous extract of Lithocarpus pachylepis leaf，AELL）对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的抑菌效果及其作用机理，为开发安全高效、低毒环保、无残留的抗MRSA药物提供理论依据。【方法】采用微量肉汤稀释法、平板菌落计数法分别测定AELL对MRSA的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC），以比浊法绘制AELL处理后MRSA的生长曲线，并通过酶标仪测定、流式细胞仪及扫描电镜等测定AELL处理后MRSA生物被膜清除作用、纤维蛋白原黏附率、呼吸代谢活力、可溶性蛋白含量、DNA含量、细胞周期分布、细胞凋亡率、胞内活性氧（ROS）水平及其形态结构特征的变化情况。【结果】AELL可能通过影响MRSA对数生长期而发挥抑制或杀灭作用，其MIC和MBC均为0.15625 mg/mL。与空白对照组相比，经AELL处理后MRSA的生物被膜含量明显下降；随着AELL处理浓度的增加，MRSA相对黏附率呈逐渐下降趋势，从47.486%下降到5.440%。随着AELL处理时间的延长，MRSA的呼吸代谢活力逐渐降低，且呼吸链脱氢酶活性明显低于空白对照组，说明AELL可能是通过抑制MRSA呼吸链脱氢酶活性促使菌株处于死亡甚至呈破碎状态。经AELL处理后，MRSA可溶性蛋白呈明显下降趋势，还扰乱MRSA细胞周期分布，使其停滞在S期，同时抑制DNA合成；MRSA的细胞凋亡率和胞内ROS水平均随AELL浓度的增加而呈逐渐上升趋势；MRSA的形态结构不规则、萎缩、畸形，细胞塌陷，细胞间隙出现裂痕，细胞壁严重弯曲、变形。【结论】AELL具有开发成抗MRSA兽药、植物杀菌剂的潜力，其抑菌机理是通过清除MRSA生物被膜，降低其对纤维蛋白原黏附力，抑制蛋白和DNA生成，阻碍呼吸代谢，延缓细胞繁殖周期及促进菌体内脂质过氧化等，从而导致菌体细胞凋亡。