春兰叶斑病病原的鉴定和分析

• 作者: 罗维宇 梁嘉莉 张荣 罗易华 冯淑杰 华南农业大学园艺学院/华南农业大学广东省群体微生物研究中心/华南农业大学林学与风景学院
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 春兰 叶斑病 鉴定 Fusarium oxysporum Colletotrichum spp
• 年，卷（期）: 2023,（1）
• 所属期刊栏目: 植物保护·农业气象
• 页码范围: 164-174
• 页数: 11页
• 语种: 中文

摘要

【目的】明确野生春兰引种驯化过程中引发叶斑病的病原菌种类，为春兰叶斑病的诊断和防治提供科学依据。【方法】采集广东省广州市和贵州省遵义市典型春兰叶斑病的病叶，利用组织分离法对病原菌进行分离纯化；依据柯赫氏法则，通过刺伤接种和摩擦接种验证其致病性；根据病原菌形态学特征，结合ITS、ACT、CAL、EF-1a、GAPDH、GS和TUB2部分序列的多基因分子系统学分析等方法进行病原菌分类鉴定。【结果】从采集的3种不同类型症状的叶斑病病叶中共检测到4株致病菌，分别命名为GZH1、GZH2、GZH3和GZH4，其中GZH1和GZH4分离自广东广州采集的叶斑病病叶，GZH2和GZH3分离自贵州遵义采集的叶斑病病叶。致病性测定结果显示，菌株GZH1表现出较强的致病性，离体针刺接种发病明显；菌株GZH2、GZH3和GZH4离体针刺接种发病不明显，通过摩擦接种可在接种部位形成典型的坏死斑。菌株GZH1在PSA培养基上的菌落特征，大、小型分生孢子，小型分生孢子梗、厚垣孢子的形态及大小均符合尖镰孢（Fusarium oxysporum）的特征，其ITS和EF-1a部分序列与F. oxysporum菌株UACH-217相应序列的一致性分别达98.23%和97.24%，结合其多基因序列构建系统发育进化树分析，菌株GZH1被鉴定为尖镰孢（F. oxysporum）。菌株GZH2、GZH3和GZH4在PDA培养基上的菌落形态，分生孢子及其附着胞的形态和大小等，分别与兰花炭疽菌（Colletotrichum cymbidiicola）、果生炭疽菌（C. fructicola）和江西炭疽菌（C. jiangxiense）的特征相似；供试菌株GZH2的ITS、ACT、CAL、GAPDH和TUB2部分序列与C. cymbidiicola菌株CBS:123757对应序列的一致性分别达99.00%、100.00%、99.00%、99.00%、99.60%；供试菌株GZH3的ITS、ACT、CAL、GAPDH和TUB2部分序列与C. fructicola菌株ICMP:18613对应序列的一致性分别达99.00%、99.00%、99.00%、100.00%、99.70%；供试菌株GZH4的ITS、ACT、CAL、GAPDH、TUB2和GS部分序列与C. jiangxiense菌株LF687的一致性分别达99.60%、99.00%、99.00%、99.00%、100.00%和97.10%；结合多基因序列构建系统发育进化树分析，菌株GZH2鉴定为兰花炭疽菌（C. cymbidiicola）、GZH3为果生炭疽菌（C. fructicola）、GZH4为江西炭疽菌（C. jiangxiense）。【结论】不同地区春兰叶斑病的病原菌组成存在差异。尖镰孢（F. oxysporum）和江西炭疽菌（C. jiangxiense）是引起广东省广州地区春兰叶斑病的病原菌，兰花炭疽菌（C. cymbidiicola）和果生炭疽菌（C. fructicola）是引起贵州省遵义地区春兰叶斑病的病原菌。其中C. fructicola和C. jiangxiense首次报道为害兰科植物，属于兰花新记录病害。