circRNA-6874/miR-30a/STIM2 通路干预心肌细胞 缺氧/复氧损伤的机制研究

• 作者: 别自东 郭影
• 来源期刊: 中西医结合心脑血管病杂志
• 关键词: 缺氧/复氧损伤 环状RNA miR-30a 基质相互作用分子2 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2023,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学论著/研究
• 页码范围: 44-50
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨环状RNA(circRNA)-6874/miR-30a/基质相互作用分子2(STIM2)通路在缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤中的作用及机制。方法:采用RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)和双荧光素酶报告基因实验检测circRNA-6874和miR-30a的结合情况、miR-30a是否靶向调控STIM2。心肌细胞转染或共转染后进行H/R处理，荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测circRNA-6874、miR-30a和STIM2的表达，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活力，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测细胞凋亡，蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测STIM2蛋白水平、生化分析仪检测乳酸脱氢酶(LDH)的释放、荧光分光光度计检测活性氧(ROS)的生成和荧光酶标仪检测Caspase-3活性。结果:circRNA-6874靶向结合miR-30a。H/R诱导心肌细胞表达circRNA-6874,其与miR-30a结合后抑制miR-30a的表达，进而促进下游靶基因STIM2的表达(P<0.05)。H/R处理明显抑制心肌细胞的存活力，促进LDH释放、ROS生成、凋亡增加和Caspase-3活性上调(P<0.05);分别转染circRNA-6874 siRNA、miR-30a mimics或STIM2 siRNA后，H/R的上述作用明显减弱(P>0.05);分别共转染circRNA-6874 siRNA和miR-30a inhibitors、miR-30a mimics和STIM2过表达载体后，H/R对心肌细胞的影响作用仍然明显(P<0.05)。结论:circRNA-6874/miR-30a/STIM2通路通过促进氧化应激和凋亡促进H/R诱导的心肌细胞损伤。