Polo样激酶1在肝细胞肝癌中的作用及临床意义

• 作者: 周杰 李敬东 张立鑫 唐涛 川北医学院附属医院肝胆外科 川北医学院肝胆胰肠研究所
• 来源期刊: 安徽医学
• 关键词: Polo样激酶1 小分子抑制剂 肝细胞肝癌 增殖抑制 诊疗靶点
• 年，卷（期）: 2024,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 27-33
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨PLK1在肝细胞肝癌中的表达、对肝癌细胞生物学行为的影响及临床转化意义。方法 使用TCGA数据库分析PLK1 mRNA在369例肝细胞癌肿瘤患者组织及160例患者癌旁组织中的表达及对无病生存期的影响。提取川北医学院附属医院肝胆外一科2019年1～6月收治的30例肝细胞癌患者的肿瘤组织及癌旁组织，应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PLK1的mRNA表达水平进行验证。选取HepG2细胞系进行功能实验，分别使用小干扰及GSK461364处理，Western blot实验检测PLK1小干扰RNA敲低效率，检测不同处理肝癌细胞生物学行为变化；流式细胞术检测不同处理细胞周期改变。使用HepG2细胞构建裸鼠皮下成瘤模型，分别给予50 mg/kg GSK461364腹膜注射和等体积生理盐水腹膜注射，20 d后收获皮下肿瘤，进行后续的拍照及免疫组化染色，比较移植瘤体积及Ki-67染色阳性率。提取数据库中患者两年随访资料，同时以PLK1表达中位值为界，将患者分为PLK1高表达组及低表达组，并采用log-rank检验进行生存分析。结果 TCGA数据库分析结果显示，PLK1在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织log2(TPM+1)值分别为(2.3±7.5)、(0.8±2.7)，差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示，PLK1高表达组无病生存期低于PLK1低表达者，差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌肿瘤组织标本分析PLK1 mRNA表达结果显示，PLK1在肿瘤组织中的表达为(2.4±1.0)高于癌旁组织(1.3±0.8)，差异有统计学意义(P<0.001)。使用两条siRNA敲低HepG2细胞中PLK1的表达，敲低效率分别为(71.3±4.8)%、(65.3±5.3)%，细胞增殖、平板克隆形成及细胞周期实验结果显示，与siCtrl组相比，siPLK1-1、siPLK1-2组肝癌细胞HpG2的细胞相对活力明显降低，细胞克隆数减少，HepG2细胞周期阻滞在G2期，差异均有统计学意义(P<0.001)。使用PLK1特异性小分子抑制剂GSK461364处理HepG2细胞，IC50=25.0 nM,CCK8、平板克隆形成及细胞周期实验结果显示，与DMSO组相比，GSK461364组HpG2的细胞相对活力明显降低，细胞克隆数明显减少，HepG2细胞周期阻滞在G2期，与小干扰结果一致，差异均有统计学意义(P<0.05)。裸鼠体内成瘤实验结果显示，相对于生理盐水注射组，GSK461364注射组小鼠的移植瘤体积明显减小[(328.3±28.4)mm3比(527.7±26.5)mm3];Ki-67阳性率明显减少，[(52.5±1.9)%比(15.2±1.9)%]，差异均有统计学意义(P<0.05)。而体质量无明显变化，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PLK1在肝细胞肝癌中高表达，与患者的总体生存率呈负相关，抑制其表达可显著降低肝癌细胞的增殖能力，减慢肝细胞肝癌进展，可作为肝细胞肝癌的潜在治疗靶点。