安五脂素通过RISK信号通路抑制大鼠心肌缺血再灌注损伤的调控机制

• 作者: 何望安 王茹 朱宏飞 蔡绍乾 魏丹 余成 单苏红
• 来源期刊: 中西医结合心脑血管病杂志
• 关键词: 心肌缺血再灌注 安五脂素 再灌注损伤救援激酶 调控机制 大鼠 实验研究
• 年，卷（期）: 2024,（22）
• 所属期刊栏目: 基础医学论著/研究
• 页码范围: 87-93
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

目的:观察安五脂素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的抑制作用，并探讨其对再灌注损伤救援激酶(RISK)通路的调控机制。方法:取60只7～9周龄SD大鼠，采用随机数字表法分为模型组、假手术组、尼可地尔组及安五脂素低、中、高剂量组，每组10只。除假手术组外，其余各组均予以冠状动脉结扎30 min再灌注120 min建立心肌缺血再灌注模型。在缺血前10 min,尼可地尔组予以含尼可地尔100μmol/L的K-H液1 mL/100 g灌注心肌，安五脂素低、中、高剂量组分别予以含安五脂素1、2、4 mg/kg的K-H液1 mL/100 g灌注心肌，模型组和假手术组仅予以等量K-H液灌注心肌。监测建模过程中各组大鼠心电图；再灌注120 min后，酶联免疫法检测各组血浆肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)水平；2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色计算各组大鼠梗死区面积/缺血危险区面积(AN/LV);苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠心肌组织病理改变，原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡；实时-逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组大鼠心肌组织蛋白激酶B(AKT)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)信使核糖核酸(mRNA)表达；免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠心肌组织AKT、ERK1/2、Bcl-2、Bax蛋白表达及磷酸化(p)-AKT、p-ERK1/2水平。结果:与假手术组比较，模型组大鼠缺血30 min后心电图S-T段明显抬高，再灌注120 min后抬高的S-T段回落；与假手术组比较，模型组CK和LDH含量、AN/LV显著升高，心肌细胞边缘基本消失，纹理变乱，明显存在红细胞进入现象，心肌细胞凋亡率、Bax mRNA和蛋白表达显著升高，AKT和ERK1/2 mRNA表达、p-AKT、p-AKT/AKT、p-ERK1/2和p-ERK1/2/ERK1/2水平、Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较，尼可地尔组和安五脂素低、中、高剂量组CK和LDH含量、AN/LV降低，心肌细胞损伤逐渐减轻、细胞逐渐变完整、边界逐渐清晰，心肌细胞凋亡率、Bax mRNA和蛋白表达降低，AKT和ERK1/2 mRNA表达、p-AKT、p-AKT/AKT、p-ERK1/2和p-ERK1/2/ERK1/2水平、Bcl-2 mRNA和蛋白表达升高，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);上述指标尼可地尔组与安五脂素低剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05);上述指标安五脂素低、中、高剂量组间呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:安五脂素可抑制心肌缺血再灌注损伤，可能与调控RISK信号通路，促进AKT和ERK1/2 mRNA表达，上调p-AKT和p-ERK1/2水平，促进Bcl-2表达，抑制Bax表达有关。