基于单细胞测序筛选川崎病静脉注射丙种 球蛋白无反应的关键生物指标

• 作者: 陈丽琴 宋思瑞 周媛媛 陈乐 徐雁冰 李光 肖婷婷 黄敏 .上海市儿童医院（上海交通大学医学院附属儿童医院）心内科 .道之精准医学科技（上海）有限公司 .上海交通大学医学院儿童感染免疫与重症医学研究院
• 来源期刊: 上海医学
• 学科: 医学
• 关键词: 川崎病;静脉注射丙种球蛋白无反应;单细胞测序
• 年，卷（期）: 2025,（7）
• 页码范围: 42-48
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19842/j.cnki.issn.0253-9934.2024.07.006

摘要

目的 应用单细胞测序（SCS）技术探索川崎病静脉注射丙种球蛋白（IVIG）治疗无反应患儿免疫细胞及表达变化，筛选相关生物指标。方法 选择2022年12月—2023年8月上海市儿童医院收治的川崎病患儿4例，其中3例为IVIG敏感患儿，1例为IVIG无反应患儿。抽取川崎病患儿急性期及治疗后体温平稳（恢复期）时的外周血2 mL,提取外周血单个核细胞，进行SCS数据分析。比较川崎病患儿的基本临床信息，SCS数据分析结果（IVIG无反应与IVIG敏感患儿急性期和恢复期各细胞类型占比和细胞数量）。进行基因本体论（GO）通路富集分析IVIG敏感和IVIG无反应患儿急性期和恢复期B淋巴细胞富集结果，以及B淋巴细胞差异表达基因（DEG）表达情况。结果 4例川崎病患儿中，男3例、女1例，年龄2.1～5.5岁，IVIG使用时发热天数5 d 2例、6 d 1例、4 d 1例，IVIG治疗无反应1例、治疗敏感3例，无冠状动脉（CAL）3例、CAL 1例（IVIG治疗无反应患儿同时并发CAL）。IVIG无反应患儿和IVIG敏感患儿急性期单核细胞数量占比均高于恢复期。IVIG无反应患儿急性期B淋巴细胞占比高于恢复期，而IVIG敏感患儿急性期B淋巴细胞占比低于恢复期；IVIG无反应患儿和IVIG敏感患儿急性期自然杀伤（NK）细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞占比均低于恢复期。IVIG无反应患儿恢复期CD8+T淋巴细胞数量（4 603）多于急性期（3 555个）,B淋巴细胞数量（329个）少于急性期（2 165个）。IVIG无反应患儿急性期和恢复期B淋巴细胞数量分别少于IVIG敏感患儿急性期（6 646）和恢复期（7 986）。IVIG无反应患儿恢复期与急性期CD8+T淋巴细胞增幅大于IVIG敏感患儿。基因富集结果显示，IVIG敏感患儿治疗后的B淋巴细胞相关的免疫活化通路及免疫球蛋白受体DEG表达下调，包括免疫应答调节细胞表面受体信号通路、免疫应答激活信号通路、抗原受体介导的信号通路等；而IVIG无反应患儿恢复期的DEG富集与B细胞活化通路及免疫球蛋白受体表达通路无关。IVIG敏感患儿在不同疾病阶段的B恢复期细胞DEG P值差异显著的HSPH1、MS4A1、FCRLA、VPREB3、CD72、LAT2、HSP90AA1、RCSD1、CD79A、FKBP4、HLA-DRB1、MTND3、HSP90AB1、PTPRCAP、CD37（共15个基因）与B淋巴细胞的免疫、增殖、分化或功能有关，其中CD79A、MS4A1、FCRLA与B细胞受体的信号传导有关。结论 B淋巴细胞数量变化及DEG表达与IVIG治疗效果相关，CD8+T淋巴细胞数量增多在川崎病患儿CAL发生机制中起重要作用。