新城疫北京强毒株融合糖蛋白(F)基因的克隆及序列分析

• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 新城疫病毒 融合糖蛋白 RT-PCR 基因克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 1998,（4）
• 页码范围: 29-32,34-37
• 页数: 1页
• 分类号: Q78,
• 语种: 中文

摘要

NDV北京强毒株F48E9经SPF鸡胚增殖,超速离心纯化,异硫氰酸胍法提取病毒RNA后,用RT－PCR扩增,得到其融合糖蛋白(F)基因.将扩增产物与PGEM○R－T载体相连接转化,经过AMP－IPTG－XGAL(AIX)平板筛选、HINDⅢ酶切及PCR鉴定,初步获得了含F基因的阳性克隆.用渐近法(PRIMERWALKING)对克隆片段进行全序列分析,证明得到了全长1744个核苷酸的NDVF蛋白基因.所获得F基因与国外已报道的6个强毒株序列进行比较,可知F48E9与其它毒株均有一定差异(氨基酸差异在26/553~44/553),但较接近于AUSTRALIA－VICTORA毒株(氨基酸差异为26/553).