人脑源性神经营养因子cDNA克隆及在酵母中的表达

• 作者: 刘志敏 戚正武 朱诚 王笑辛 蓝正道 谢志伟
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人脑源性神经营养因子 基因表达 酿酒酵母
• 年，卷（期）: 1998,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 215-218
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.1998.03.005

摘要

目的:克隆和表达人脑源性神经营养因子(hBDNF).方法和结果:从原代培养人雪旺细胞中提取总RNA,用RT-PCR法获取了编码带前导肽的和成熟的hBDNF 2个cDNA片段,经DNA测序表明其顺序与文献报道一致.将这2个cDNA片段分别插入到大肠-酵母穿梭质粒pVT102U/α上.用酵母整体细胞法将重组质粒转化酵母宿主细胞,经筛选后,获得分泌性表达.表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定,大小都在15 000左右.将这2种部分纯化的BDNF样品经鼠胚背根神经节生物活性分析,表明具有明显的促进细胞存活和突起生长的作用.结论:hBDNF能在酿酒酵母系统获得有生物活性的表达.