小鼠红细胞分化相关因子cDNA片段的克隆与分析

• 作者: 刘世广 唐文 张世馥 章正琰 章静波 薛社普 马静
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 红系细胞 细胞分化 减除杂交 cDNA克隆
• 年，卷（期）: 1999,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 94-98
• 页数: 5页
• 分类号: R329.R+1|R331.1+41
• 语种: 中文

摘要

目的克隆与小鼠红细胞终末分化相关因子的基因,并对其表达特性进行分析.方法用致贫血Friend病毒(FVA)诱导BALB/c小鼠脾脏产生大量FVA原红细胞,后者经分离纯化并在促红细胞生成素作用下进行体外培养.采用减除杂交与PCR相结合的方法,用未经培养的FVA诱导的原红细胞(0 h FVA原红细胞)的cDNA对培养36 h的FVA诱导的成红细胞(36 h FVA成红细胞)的cDNA进行多次减除杂交和PCR扩增,构建上述36 h cDNA的质粒减除文库并进行差异筛选.对阳性克隆进行核苷酸序列测定及Northern印迹分析.结果获得1个472 bp的cDNA片段,其中含有1个309 bp的开放阅读框架,编码102个氨基酸.经GenBank进行同源比较,未发现同源序列,已被GenBank接受,(编号AA¨4369).Northern印迹分析表明,该cDNA在培养36 h的FVA中、晚幼红细胞中呈差异表达,其mRNA全长约为500～600bp左右.将其暂命名为小鼠红细胞分化相关因子(MEDRF)基因.结论 MEDRF基因在红细胞分化的中、晚幼阶段特异表达,表明MEDRF是一个新的与红细胞终末分化相关的因子.