黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因克隆及在病毒检测中的应用

• 作者: 刘勇 周雪平 张德咏 李德葆 王小平
• 来源期刊: 湖南农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 黄瓜花叶病毒 外壳蛋白基因 克隆 检测
• 年，卷（期）: 1999,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 361-365
• 分类号: S642.2|S436.421.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-1032.1999.05.004

摘要

根据已经发表的黄瓜花叶病毒(CMV)外壳蛋白基因的序列,人工合成引物,通过反转录和PCR扩增并克隆了黄瓜花叶病毒辣椒分离物P33(CMV-P33)的外壳蛋白基因,构建到质粒PBS的HincⅡ位点.重组质粒经SmaⅠ酶切后,在0.8%低熔点琼脂糖上电泳,回收克隆的CP基因片段(约0.7 kb),用切口平移的方法进行α-32PdATP标记.以此为探针,通过点杂交技术检测提纯的病毒CMV-P33和R1株系、CMV-P33的RNA,及受CMV侵染的辣椒叶片汁液,结果表明:提纯的CMV-P33和R1株系的最低检出量分别为1ng和4ng,CMV-P33的RNA为0.1ng.检测受CMV侵染的辣椒叶片汁液时,最大稀释倍数为100倍.其次,用该探针检测健康辣椒和受烟草花叶病毒(TMV)、马铃薯Y病毒侵染的烟叶汁液时,检测反应均为阴性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周雪平	浙江大学生物技术研究所	122	2526	26.0	45.0
2	李德葆	浙江大学生物技术研究所	76	2052	28.0	43.0
3	王小平		11	130	7.0	11.0
4	张德咏		2	39	2.0	2.0
5	刘勇		2	21	2.0	2.0