口腔唾液富组蛋白抗菌及中和内毒素活性

• 作者: 吴琦 杨美薷 王伯瑶 罗海燕
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 1999,（8）
• 所属期刊栏目: 中国病理生理学会炎症发热感染低温专业委员会学术会议论文摘要
• 页码范围: 757
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.1999.08.078

摘要

唾液构成牙齿和口腔软组织的化学环境,与口腔健康密切相关.现已分离纯化出40多种唾液蛋白,其中发现多种抗菌成分,如溶菌酶、乳铁蛋白、唾液过氧化物酶、分泌型IgA等.新近发现一类小分子阳离子抗菌肽特别引人注目.因其分子富含组氨酸,故称之为富组蛋白(histatins).本文用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳(AU-PAGE),从健康成人刺激性唾液中分离纯化了3种主要富组蛋白,即HRP-1、-3和-5.经Tricine-SDS-PAGE分析所得分子均为单一条带,说明纯度很高,其分子量3～5 kD.分离纯化富组蛋白的方法很多,本试验采用制备性AU-PAGE分离纯化富组蛋白,具有分辨率高、操作简便、纯化效率好等特点,但该法获得率不太高,有待改进.采用琼脂糖弥散抗菌试验显示3种富组蛋白对变形链球菌和金色葡萄球菌均有抗菌活性;对大肠杆菌和绿脓杆菌,HRP-3和HRP-5有明显抗菌活性,而HRP-1无抗菌活性.其抗菌活性随浓度增高而增大.HRP-3和HRP-5的抗菌活性强于HRP-1.3种主要富组蛋白对革兰氏阴性专性和兼性厌氧的牙周可疑致病杆病,在本检测系统中均未显示抗菌活性.采用Wesphal热酚水法提取牙龈卟啉菌(47-A)和具核梭杆菌临床分离株的LPS,并用酶消化法配合超速离心进行纯化.采用鲎试验试管法观察了HRP-5对LPS的中和作用.结果显示两株菌的LPS在浓度≥1 ng/mL时,均显示较强鲎活性,与标准大肠杆菌LPS的鲎活性相似.HRP-5 (10 μg/mL)对牙龈卟啉菌、具核梭杆菌和大肠杆菌LPS(1 ng/mL)的鲎活性,均具相同的抑制作用.本试验提示唾液富组蛋白可能通过中和牙周可疑致病杆菌的内毒素,在维护牙周健康上发挥一定作用.