猪生殖和呼吸综合征中国分离株ORF5基因的克隆及序列分析

• 作者: 刘尚高 林志雄 赵耘 陈博文
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪生殖和呼吸综合症病毒 中国分离株B13 ORF5基因 克隆 序列测定
• 年，卷（期）: 1999,（Z1）
• 页码范围: 77-82
• 分类号: Q74
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-4333.1999.Z1.015

摘要

本研究利用对应于PRRSV ATCC VR-2332株及LV株ORF5基因保守序列的1对均为25个碱基的引物1005PS、1006PR对PRRSV中国分离株B13进行RT-PCR,扩增出了包括完整ORF5基因的DNA片段,片段长约730 bp.将此片段定向克隆入pUC18载体的EcoRⅠ和PstⅠ位点之间, 获得了B13 ORF5基因与pUC18载体的重组质粒.通过EcoRⅠ/PstⅠ、EcoRⅠ/HindⅢ及PCR方法证明此重组质粒为B13 ORF5基因与pUC18载体的重组质粒.同时,对此ORF5基因进行全序列测定,并与ATCC VR-2332及LV序列做了比较.结果B13ORF5序列与LV的十分相似,其核苷酸同源性达到99.7%,氨基酸序列完全相同,而与ATCC VR-2332株则相差甚远,其核苷酸和氨基酸同源性分别为59.2%和56.0%.故而B13在基因结构上与LV较为接近.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘尚高	中国农业大学动物医学院	33	358	10.0	18.0
2	陈博文		13	114	3.0	10.0
3	林志雄		8	154	3.0	8.0