人IL-12的克隆、表达及生物活性的鉴定

• 作者: 孙宗棠 曲春枫
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人IL-12 树突状细胞 DNA序列 生物学活性
• 年，卷（期）: 1999,（1）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 13-15
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2690字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆中国人IL-12 p40基因,构建IL-12的真核基因表达载体.方法:采用RT-PCR从北京地区人脐血树突状细胞(DC)中克隆IL-12 p40cDNA基因,并进行序列分析.利用pcDNA3.1和pLXPXSN构建IL-12表达载体,转染人肝癌细胞后对其进行生物学和免疫学分析.结果:北京地区人DC中IL-12 p40cDNA基因210位密码子有独特的结构,为GCC(Ala).并且239和291位密码子与已报道的NKSF和CLMF p40序列各有异同,在与国外提供的p35基因共同转染细胞后能产生功能性的IL-12.用其构建的IL-12双亚基共表达逆转录病毒载体在转染肝癌细胞株并经选择后,上清液中有较高的具有刺激淋巴母细胞增殖活性的IL-12.Western blot分析结果显示,在70 kD处有特异性的蛋白条带出现.结论:支持人IL-12p40基因可能存在着多态性的假设;IL-12的产生需要p35和p40基因的共同表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙宗棠	中国协和医科大学肿瘤研究所	2	36	2.0	2.0
2	曲春枫	中国协和医科大学肿瘤研究所	1	17	1.0	1.0