人端粒酶亲和纯化方法的建立及其初步鉴定

• 作者: 刘为纹 周子成 府伟灵 房殿春 杨仕明 杨金亮 陈兵
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 端粒酶 核糖核蛋白 亲和纯化 胃肿瘤
• 年，卷（期）: 1999,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 726-728
• 分类号: Q782|Q55
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.1999.10.009

摘要

目的:建立一种亲和纯化人端粒酶的手段.方法:酶切鉴定人端粒酶RNA(hTR)质粒,所切下的hTRcDNA片段用生物素标记后与链霉亲和素琼脂糖珠耦连,用高端粒酶活性的胃肿瘤细胞提取液与之反应,利用端粒酶核糖核蛋白的特性,形成链霉亲和素琼脂糖珠-生物素标记hTRcDNA-hTR-端粒酶蛋白组份复合物,核酸解离液洗脱后获得亲和纯人端粒酶.其活性用宝灵曼公司端粒酶试剂盒检测,定量利用Beckman DU-640检测仪进行.结果:酶切鉴定的结果与hTR质粒图谱吻合.生物素hTRcDNA与链霉亲和素琼脂糖珠耦连量为31.71 μg,耦连率为98.38%.纯化后的端粒酶活性保持良好,相对纯化程度为108.46.结论:本研究中建立的方法是一种可行的端粒酶纯化手段,可用于人端粒酶的深入研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	府伟灵	第三军医大学附属西南医院消化内科	406	5132	33.0	56.0
2	房殿春	第三军医大学附属西南医院消化内科	349	2116	20.0	30.0
3	刘为纹	第三军医大学附属西南医院消化内科	80	651	14.0	21.0
4	杨仕明	第三军医大学附属西南医院消化内科	97	741	14.0	20.0
5	杨金亮	第三军医大学附属西南医院消化内科	19	180	8.0	12.0