甲氨蝶呤对单核细胞样细胞系U937的生长影响及其促凋亡作用

• 作者: 卞锦国 叶裕春 叶辉 薛惠良 陈宏新 陈静 顾龙君
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲氨蝶呤 U937细胞系 细胞凋亡 急性髓细胞白血病 急性单核细胞白血病
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 43-47
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 2599字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2000.01.009

摘要

一般认为急性髓细胞白血病(AML)是对甲氨蝶呤(MTX)原发耐药的恶性肿瘤.AML细胞除急性单核细胞白血病(AML-M5)细胞与MTX孵育时,由于不能象急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞一样形成足够量的长链聚谷氨酸盐甲氨蝶呤(MTXPG),而被认为对MTX不敏感.为了开发对AML-M5新的治疗,本实验采用了具有单核细胞特征的U937细胞系进行研究.细胞分别通过不同浓度(1 nmol/L-100μmol/L)MTX孵育24小时或48小时后,通过XTT法评估细胞生长抑制情况.24小时的半数抑制浓度(IC50)为0.04μmol/L;48小时的IC50为0.037μmol/L,90%细胞抑制浓度(IC90)为0.39μml/L.为了解MTX细胞毒作用的发生机制,进一步分析了细胞的死亡过程.采用了系列实验,包括台盼蓝拒染法、流式细胞术、显微镜(瑞氏染色法)及DNA片段分析进行研究.结果在MTX作用后短时间内(4或6小时)无明显的细胞凋亡特征出现.随5 nmol/L-10μmol/L MTX作用8小时后,亚G1(凋亡)峰的比率从0.1μmol/L的3.2%增加到5.0μmol/L的18.2%,S期的比率从0.01 μmol/L的41.2%到10 μmol/L的19.1%.可见到DNA片段电泳后细胞凋亡的特征性改变.MTX所引发U937细胞的生长阻滞和凋亡特征,提示它可用于AMLM5治疗的潜在可能.