肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的克隆、表达及重新折叠

• 作者: 吴时丽 王新娟 蔺新力 魏晓超
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 基因表达 蛋白质折叠 克隆,分子 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 肿瘤坏死因子/代谢
• 年，卷（期）: 2000,（5）
• 所属期刊栏目: 疾病基因研究
• 页码范围: 387-390
• 页数: 4页
• 分类号: Q343.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-167X.2000.05.002

摘要

目的:人的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF- related apoptosis inducing li gand, TRAIL)基因经扩增后,克隆在大肠杆菌中表达并重新折叠并获得有活性的TRAIL蛋白 . 方法:用PCR的方法从人胎盘cDNA文库中扩增TRAIL基因,经序列分析鉴定 ,再克隆到原核表达载体pET11a,经E.coli BL21(DE3)表达,电泳鉴定后,柱层析纯化, 重新折叠,流式细胞术等方法检测其促凋亡活性.结果:得到了TRAIL基因,并构建了可在大肠杆菌中表达的载体pET11-TRAIL1(含TRAIL cDNA 序列418-933)及可在真核细胞中表达的载体pLNCX-TRA IL 2(含TRAIL cDNA 序列88-933).取前者在E.coli BL21(DE3)中表达,经纯化,重新折叠得到了复性的TRAIL蛋白.检测其对人白血病细胞株Jurkat有诱导凋亡的作用.结论 :从人胎盘cDNA文库中扩增TRAIL基因,在大肠杆菌中表达、重新折叠、纯化后,经检测得到了有活性的TRAIL蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王新娟	北京大学基础医学院	12	70	6.0	8.0
2	魏晓超	北京大学基础医学院	4	17	2.0	4.0
3	吴时丽	美国Oklahoma 医学研究所蛋白质研究室	1	5	1.0	1.0
4	蔺新力	美国Oklahoma 医学研究所蛋白质研究室	1	5	1.0	1.0