抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体死亡受体5嵌合抗体的构建及其真核表达

• 作者: 刘士廉 刘彦信 郑德先 郭雅彬 陈凤
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 抗死亡受体5嵌合抗体 中国仓鼠卵巢细胞 人IgG轻链 人IgG重链
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 690-695
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.2008.06.014

摘要

目的 构建以人肿瘤坏死冈子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体死亡受体5(DR5)为抗原的鼠/人重组嵌合抗体.方法 采用基因工程技术,扩增和克隆抗DR5嵌合抗体的轻、重链表达载体,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr),筛选稳定分泌表达抗DR5嵌合抗体的细胞株.采用ELISA和Western bloting法鉴定抗体的人源性和抗体-抗原结合活性,四唑盐/吩嗪硫酸甲酯比色法检测抗体的生物学活性.结果 获得了稳定表达和分泌抗人DR5的嵌合抗体(anti-DR5 mV-hH)的重组细胞;与人DR5蛋白具有高的特异性结合活性;能使体外培养的人髓性白血病Jurkat细胞和人结肠癌HCT116细胞的存活率分别下降到73.15%和77.30%.结论 抗DR5嵌合抗体anti-DR5 mV-hH具有抗肿瘤活性,为发展人源化抗体药物的研究奠定了基础.