牛生长激素释放因子类似物基因的克隆与表达

• 作者: 仲跻峰 冯敏燕 王庆国 王文英 马世援 高运东
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: bGRF类似物基因 化学合成 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2000,（4）
• 页码范围: 296-300
• 页数: 5页
• 分类号: S813
• 字数: 390字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2000.04.002

摘要

本研究以近期报道的高生物学活性、高代谢稳定性的牛生长激素释放因子类似物(Ile2,Ala15,Leu27)bGRF(1-29)-NH2的氨基酸序列为模板,选用大肠杆菌高效表达所偏爱的密码子设计出该基因的全序列.采用化学合成法合成两个3′末端有19碱基互补的80碱基的寡核苷酸片段.并互为模板和引物,通过酶促延伸合成完整的bGRF类似物基因,克隆于pT7 Blue T-Vector中,通过蓝/白筛选和酶切分析确定了阳性克隆.然后将目的基因从pT7 Blue T-Vector克隆于pUC18载体中,以便多拷贝基因的制备.通过测序证明我们获得了目的克隆.将目的基因首尾串联,制备得到的16拷贝基因在温控启动子PRPL调控下于大肠杆菌中获得表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	仲跻峰	山东省农业科学院生物技术研究中心	137	888	15.0	20.0
2	王文英	山东省农业科学院生物技术研究中心	13	106	7.0	10.0
3	高运东	山东省农业科学院生物技术研究中心	72	515	12.0	18.0
4	王庆国	山东省农业科学院生物技术研究中心	11	30	4.0	5.0
5	马世援	山东省农业科学院生物技术研究中心	6	36	4.0	6.0
6	冯敏燕		1	0	0.0	0.0