重组人粒细胞集落刺激因子在Escherichia coli中的表达研究

• 作者: 乌垠 李玉新 杨红 胡波 郝水 陆军 麻彤晖
• 来源期刊: 东北师大学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 粒细胞集落刺激因子 原核表达 突变体
• 年，卷（期）: 2000,（4）
• 页码范围: 46-51
• 页数: 6页
• 分类号: Q784
• 字数: 4505字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1832.2000.04.011

摘要

根据人天然粒细胞集落刺激因子(G-CSF)基因序列设计出引物,通过RT-PCR从人外周血单个核细胞mRNA获得G-CSFcDNA片段.将该片段与原核表达载体pT7构建成重组体,导入大肠杆菌后发现天然G-CSFcDNA表达量并不理想.这可能是由于天然hG-CSF5'端G+C的比例过高,使转录后的mRNA很容易形成二级结构而影响翻译起始,因此在大肠杆菌中很难获得高效表达.根据密码子简并性原则,在不改变编码氨基酸顺序的前提下,通过重新设计PCR引物,将hG-CEF的前3个氨基酸密码子中的几个GC碱基作了改动,获得了新的cDNA突变体,将其与pT7的重组体导入大肠杆菌,获得了高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉新	东北师范大学遗传与细胞研究所	35	592	13.0	23.0
2	陆军	东北师范大学遗传与细胞研究所	22	152	6.0	11.0
3	胡波	东北师范大学遗传与细胞研究所	11	72	5.0	8.0
4	乌垠	东北师范大学遗传与细胞研究所	16	257	9.0	16.0
5	郝水	东北师范大学遗传与细胞研究所	21	194	6.0	13.0
6	杨红	东北师范大学遗传与细胞研究所	9	165	7.0	9.0
7	麻彤晖	东北师范大学遗传与细胞研究所	3	22	3.0	3.0