表达hEGF导入基因的角朊细胞促进体外培养的正常角朊细胞增殖

• 作者: 刘毅 惠宏襄 汤朝武 胡大海 阎小军 陈璧
• 来源期刊: 西北国防医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人表皮细胞生长因子 基因 真核表达质粒 人角朊细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 83-86
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-8622.2000.02.001

摘要

目的:观察含外源性人表皮细胞生长因子(hEGF)基因改造的角朊细胞(hEGF-MHK),对正常培养的角朊细胞(NHK)增殖的影响;探讨转hEGF基因HK对创面愈合的生物学效应及作用机理.方法:收集含真核表达质粒pcDNA3-hEGF的hEGF-MHK细胞培养上清,采用放射免疫分析法测定收集的上清液中hEGF含量;以10%的浓度加入由正常人皮肤组织分离培养的NHK细胞培养基内;MTT法测定NHK细胞培养15 d内的增殖速率并绘制细胞生长曲线;3H-TdR掺入法测定细胞培养72 h内的DNA合成速率.结果:转基因HK细胞培养上清内含有高水平的免疫活性hEGF,培养7～9 d的测定值为每天约(37.89±4.13～35.79±4.33)μg·L-1, 而正常HK培养上清、转染空载体的HK培养上清内均低于5 μg·L-1;加10%的转基因HK细胞培养上清的NHK增殖明显加快, 较对照组提前4 d以上融合达到生长平台期;转基因HK细胞培养上清作用24 h后可使NHK细胞DNA合成率明显提高.结论:含hEGF基因真核表达质粒的hEGF-MHK细胞具有表达分泌hEGF的功能, 分泌的hEGF可促进NHK细胞生长增殖, 其机理为启动NHK细胞DNA合成;说明hEGF-MHK细胞可借助旁分泌途径刺激正常角朊细胞增生, 提示其活体移植后促进创面利用残余角朊细胞再生修复的潜在应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘毅	兰州军区兰州总医院烧伤整形科	324	1478	16.0	21.0
2	陈璧	第四军医大学西京医院烧伤外科	140	1092	16.0	24.0
3	胡大海	第四军医大学西京医院烧伤外科	165	1002	15.0	20.0
4	汤朝武	第四军医大学西京医院烧伤外科	70	409	11.0	15.0