PCR扩增肠癌组织P53基因失败的原因分析与解决

• 来源期刊: 江西医学检验
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 P53基因 肠癌
• 年，卷（期）: 2000,（3）
• 页码范围: 132-134
• 页数: 3页
• 分类号: R730.2
• 语种: 中文

摘要

分析与解决PCR扩增肠癌组织P53基因时失败的问题,为如何解决PCR技术在科研应用中的问题提供一个实例.方法 经初步分析,将失败原因确定为DNA模板有问题、采用下列方法处理模板再进行PCR反应:用70%乙醇再清洗模板、用新标本重新提取模板、用PCR反应成功与失败的模板配成混合模板.比较PCR成功与失败所用模板的差异,寻找与证实失败的原因.结果 最终发现溶解DNA模板的TE缓冲液浓度过高,使PCR扩增失败,排除之后获得成功.结论 当PCR扩增失败时,不妨从最简单的反应体系的离子环境先找原因.