血小板生成素基因的克隆及在原核细胞的表达

• 作者: Zheng Shu 刘陕西 王怀宇 郑树 陈念祖
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 血小板生成素 基因表达 分子克隆
• 年，卷（期）: 2000,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 500-511
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2000.06.001

摘要

目的克隆人血小板生成素(hTPO)基因，并使其在原核细胞中获得表达。方法先从人胚胎肝脏中提取总RNA，进行RI-PCR获得编码氨基端195个氨基酸残基的hTPO195 cDNA。将该片段亚克隆至pGEM-T easy克隆质粒中，以双脱氧链末端终止法对克隆质粒直接测序。接着将cDNA插入到原核表达质粒pET28-a中，转化大肠杆菌BLR21(DE3)，进行诱导表达，以SDS-PAGE方法及免疫印迹法进行检测。结果得到的hTPO195cDNA与文献报道的序列完全一致。经诱导后hTPO基因在大肠杆菌中获得表达，目的蛋白占总菌体蛋白约10％，以免疫印迹法证实表达产物正确。结论得到cDNA，并在原核细胞中获得表达，得到截短形式的rhTPO195.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘陕西	西安交通大学第一医院血液科	47	518	13.0	21.0
2	王怀宇	西安交通大学第一医院血液科	10	63	4.0	7.0
3	郑树	西安交通大学第一医院血液科	1	2	1.0	1.0
4	陈念祖	西安交通大学第一医院血液科	2	6	2.0	2.0