MTT显色反应实验条件分析

• 作者: 牛青霞 赵承彦 靖志安
• 来源期刊: 河南医学研究
• 学科: 医学
• 关键词: MTT 酶释放法 比色方法
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 107-111,116
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12
• 字数: 5867字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-437X.2000.02.004

摘要

目的：检验分析MTT实验方法本底高、灵敏度低、稳定性差的影响因素，改进实验条件提高灵敏度和稳定性，降低本底。方法：用MTT比色方法，细胞毒试验及细胞增殖实验，分析比较不同条件下MTT显色反应的性能特点。结果：比较了13种溶剂对Formazan的溶解性能。分析检验了琥珀酸脱氢酶在细胞上的分布特点、pH值对MTT反应体系的影响、酚红和牛血清对检验结果的影响，提出相应对策。检测了MTT反应时间曲线和细胞活力曲线。分析了改进后的MTT实验方法的灵敏度和稳定性。结论：以MTT为底物的酶在细胞代谢中主要分布在细胞膜表面。MTT反应体系的pH值为6.7，比较好的Formazan溶剂是正丙醇、异丙醇和乙二醇乙醚。去掉细胞培养上清，检测细胞上的酶，用溶剂使蛋白质变性，经沉淀去掉蛋白质影响，能使MTT实验方法的本底降低，灵敏度提高。通常情况下该方法检测K-562细胞和人淋巴细胞的灵敏度分别为1000和10000个细胞左右。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵承彦	河南省肿瘤研究所生物医学研究室	4	54	1.0	4.0
2	靖志安	河南省肿瘤研究所生物医学研究室	3	54	1.0	3.0
3	牛青霞	汕头大学医学院微生物系	17	107	4.0	10.0