肝癌乙型肝炎病毒X抗原相关基因的克隆

• 作者: Clayton M Feitelson M LIAN Zhaorui PAN Jinbo 丁杰 刘杰 吴开春 朱明华 樊代明 窦科峰 胡家露
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 抑制差减杂交 基因克隆 HBxAg
• 年，卷（期）: 2000,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 159-162
• 页数: 4页
• 分类号: R512.62
• 字数: 3305字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-1432.2000.03.004

摘要

目的观察HepG2细胞因乙型肝炎病毒X抗原(HBx)转染导致的基因表达差异。方法①用逆转录病毒感染的方法建立表达乙型肝炎病毒X抗原(HepG2X)及氯霉素乙酰转移酶(HepG2Cat)的细胞模型。②用抑制差减杂交的方法做HepG2X和对照细胞(HepG2Cat)的cDNA文库差示筛选。③用32P随机引物标记法标记探针做Northern Blot杂交及地高辛缺口翻译标记法做原位分子杂交以筛选基因探针。结果经cDNA文库差减杂交及抑制性PCR扩增共得到10个cDNA探针，其中8个被HBx所启动，2个因HBx而表达下降。经检测，这些基因在HepG2X和对照细胞中的表达均有差异。在被HBx所抑制的2个差示表达基因中，1个与人的蛋白翻译起始因子同源，同时发现，此基因在正常组织中表达较强，而在肿瘤组织中表达被抑制。结论 HBx能够改变宿主细胞的基因表达，并且这些基因变化可能和肝癌发生有关。