反义RNA对培养的肾小管上皮细胞骨调素表达的调节

• 作者: 余学清 吕军 尹培达 李锦华 范崇伦 陈伟英 陈永雄 黄凌虹
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA,反义 肾小管 表皮生长因子-尿抑胃素
• 年，卷（期）: 2000,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1153-1158
• 页数: 7页
• 分类号: R737.9
• 字数: 5075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2000.11.001

摘要

目的:探讨骨调素(OPN)反义RNA对培养的肾小管上皮细胞骨调素表达的影响.方法:脂质体介导将表达OPN反义RNA的逆转录病毒重组载体转染大鼠肾小管上皮细胞系NRK52E细胞,建立稳定表达OPN反义RNA的肾小管上皮细胞克隆,以转染了表达OPN顺义RNA和空白逆转录病毒载体的肾小管上皮细胞克隆为对照,以表皮生长因子(EGF)为刺激剂,通过核酸酶保护分析(RPA),WestemBlot,ELISA和OPN生物活性分析检测上述克隆细胞的OPN表达.结果:OPN反义RNA仅被反义克隆细胞表达,反义克隆、顺义克隆和空白克隆细胞均有OPNmRNA的表达,ECF能增加它们OPNmRNA的表达水平,但不增加反义RNA或顺义RNA的表达水平;加或不加EGF的反义克隆细胞和不加EGF的空白克隆细胞无OPN蛋白的表达,加或不加EGF的顺义克隆细胞和加EGF的空白克隆细胞有OPN蛋白的表达.结论:OPN反义RNA能抑制肾小管上皮细胞OPNmRNA的翻译而抑制OPN蛋白的表达,但不抑制OPNmRNA的转录.