重组人肝细胞生长因子真核表达的定性及定量检测

• 作者: 丘玉昌 吴曙光 徐伟
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 重组人肝细胞生长因子 真核表达 ELISA法
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 60-62
• 页数: 3页
• 分类号: R975.5
• 字数: 2276字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2001.01.012

摘要

将人肝细胞生长因子（human hepatocyte growth factor , hHGF）全长cDNA重组入pEE14真核稳定表达质粒，用lipofectin脂质体将pEE14/rhHGF转染入CHO-K1细胞，蛋氨酸亚氨基代砜（methionine sulfoximine, MSX）筛选出阳性细胞克隆。利用RT-PCR检测rhHGF mRNA的表达，通过ELISA法测定rhHGF的蛋白表达，3H掺入法检测培养上清液对大鼠原代培养肝细胞DNA合成的影响。结果表明转染pEE14 /rhHGF的细胞可扩增出hHGF特异的396　bp RT-PCR片段，培养上清液明显促进大鼠肝细胞DNA的合成，ELISA法测出上清液中rhHGF的含量在8　μg/L以上，显示rhHGF在CHO细胞中以活性形式得到表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐伟	第一军医大学药物研究所	24	102	6.0	9.0
2	吴曙光	第一军医大学药物研究所	66	638	12.0	24.0
3	丘玉昌	第一军医大学药物研究所	3	3	1.0	1.0