抑癌基因 PTEN/MMAC1的cDNA克隆及其表达质粒的构建

• 作者: 傅继梁 张晓琴 陈坚
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 抑癌基因 PTEN MMAC1 酵母双杂交系统
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2503字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2001.01.001

摘要

为了获得PTEN/MMAC1的cDNA并构建其酵母双杂交系统中的诱饵质粒和逆转录病毒表达质粒。利用RT PCR方法，从293细胞中扩增出一约1.2 kb的DNA片段，与pGEMT Easy连接，作全自动测序确证，重组入pLexA载体，构建成pLexA PTEN/MMAC1，并用醋酸锂法转化酵母菌EGY48(p8op LacZ)，在选择性培养基上观察pLexA PTEN/MMAC1在EGY48(p8op LacZ)中的表达情况；同时，PTEN/MMAC1的cDNA也重组入pLXSN构建pLXSN PTEN/MMAC1。结果PCR获得1.2 kb的DNA序列与文献报道的PTEN/MMAC1的cDNA一致，转化的酵母菌在选择性培养基上培养3 d后，长出约1 mm大小的白色菌落；pLXSN PTEN/MMAC1可酶切出1.2 kb的PTEN/MMAC1片段。结果表明获得了PTEN/MMAC1的cDNA，pLexA PTEN/MMAC1可作为酵母双杂交系统中的诱饵质粒，而pLXSN PTEN/MMAC1的构建为进一步研究其抑癌作用打下了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	傅继梁	第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所	53	227	8.0	12.0
2	张晓琴	第二军医大学长海医院感染科	13	31	3.0	5.0
3	陈坚	第二军医大学海医系军队卫生教研室	24	183	8.0	13.0