应用Bac to Bac 系统表达NDV长春株HN蛋白基因

• 作者: 丁壮 殷震 王兴龙 王宏伟 米志强 金宁一 金扩世
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 新城疫病毒 HN基因 BaotoBac系统 表达
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 56-58,82
• 页数: 4页
• 分类号: Q813.6|Q78
• 字数: 3296字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2001.02.016

摘要

将质粒pKSHNC利用BamHI和XbaI双酶切后回收。将转座载体pFast BacI同样方法酶切、回收。将回收的HNC与pFast BacI连接，使目的基因亚克隆到pFast BacI上的ocu 基因启动子下游的MCS上，然后转化E.coli DH5 α, 以LB/AMP+GM平板筛选阳性重组子，经酶切鉴定，再转化至 E.coli DH10 Bac感受态细胞中，经抗性培养和蓝白斑筛选，挑取白色菌落为阳性重组表达载体，经酶切鉴定后，命名为Bacmid HNC。经小量提取后，转染sf-9细胞，27 ℃培养72 h，应用SDS-PAGE和Western-blot检测和鉴定表达的HN蛋白。结果表明，本研究成功地构建了Bacmid HN重组表达载体，并在sf-9昆虫细胞中表达了NDV长春株HN基因，SDS-PAGE出现一条特异性泳带，约74 kDa，Western-blot结果出现一条杂交带，分子量与之相同，进一步证明构建的重组表达载体表达了NDV长春株HN基因。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王兴龙	解放军军需大学军事兽医研究所	33	517	14.0	22.0
2	金扩世	解放军军需大学军事兽医研究所	21	156	9.0	12.0
3	金宁一	解放军军需大学军事兽医研究所	138	903	16.0	21.0
4	王宏伟	解放军军需大学军事兽医研究所	19	125	7.0	10.0
5	殷震	解放军军需大学军事兽医研究所	58	525	13.0	19.0
6	丁壮	解放军军需大学军事兽医研究所	20	263	9.0	16.0
7	米志强	解放军军需大学军事兽医研究所	11	119	6.0	10.0