昆虫细胞表达基因Ⅶ NDV HN基因的免疫效力研究

• 作者: 成子强 李云龙 汪鹏旭 王善辉 薛忠
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 HN蛋白 重组杆状病毒 昆虫细胞 免疫效力
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 21-25
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13610/j.cnki.1672-352x.20151224.015

摘要

利用杆状病毒表达系统对Ⅶ NDV HN基因进行表达研究.RT-PCR扩增HN基因,将其克隆到pFastBacHTA载体中,阳性重组质粒转化DH10Bac感受态细胞,PCR鉴定获得阳性克隆,碱裂解法提取阳性质粒,转染Sf9昆虫细胞,获得含HN基因的重组杆状病毒质粒,重组病毒感染Sf9细胞72h后,进行SDS-PAGE电泳、间接免疫荧光和Western-blot试验.免疫SPF鸡,间接ELISA测定抗体滴度,攻毒保护试验检测重组HN蛋白保护性.结果显示,目的蛋白HN在昆虫细胞中有特异性表达,该蛋白诱导了高滴度的NDV特异性抗体,具有良好的免疫原性;强毒攻击保护率达到75％,与La sota疫苗组保护率接近,均明显高于阴性对照组.上述结果为NDV新型亚单位疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	成子强	山东农业大学动物科技学院	60	938	14.0	29.0
2	汪鹏旭	徐州生物工程职业技术学院动物工程系	23	30	3.0	4.0
3	薛忠	徐州生物工程职业技术学院动物工程系	48	85	3.0	8.0
4	李云龙	徐州生物工程职业技术学院动物工程系	38	43	3.0	4.0
5	王善辉	徐州生物工程职业技术学院动物工程系	10	11	3.0	3.0