Streptomyces griseochromogenes菌株milbemycin生物合成基因簇的筛选

• 作者: IKEDA Haruo MURA Satoshi 阎浩林
• 来源期刊: 沈阳药科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 柯氏质粒pku403 包装蛋白 转化 基因文库 聚酮体合成酶(PKS) 菌落原位杂交 核酸杂交 PCR
• 年，卷（期）: 2001,（5）
• 所属期刊栏目: 微生物与生物制药
• 页码范围: 345-349
• 页数: 5页
• 分类号: R97
• 字数: 3731字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2858.2001.05.011

摘要

经Bam HI酶切的柯氏质粒pku403与Mbo Ⅰ部分消化并经碱性磷酸酶处理的Streptomyces griseochromogenes染色体DNA片段相连接,体外包装后,转化大肠杆菌E.coli JM108,挑取转化子1 152个,构建Streptomyces griseochromogenes的基因文库.分别以avermectin聚酮体合成酶(PKS)的酰基转移酶基因(AT)、酮基合成酶基因(KS)及参与avermectin生物合成的内酯化酶基因(aveE)、C5-O-甲基转移酶基因(aveD)为探针,利用菌落原位杂交、核酸杂交和以烯酰基还原酶基因(ER)引物的PCR扩增等手段,从文库中筛选出24个阳性克隆.根据克隆DNA之间的重叠关系,将阳性克隆分为7组,这7组阳性克隆群可能覆盖控制milbemycin生物合成的基因簇.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阎浩林	沈阳药科大学制药工程学院	17	124	6.0	10.0