人胎盘来源的金属蛋白酶抑制因子-3的分离纯化及性质研究

• 作者: 伊德林 徐军 曾艳 潘晓蔚 王嘉伦 罗阳 邹黎明
• 来源期刊: 沈阳医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 组织金属蛋白酶抑制因子 基质金属蛋白酶 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 基础·临床医学
• 页码范围: 125-128
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2110字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-2344.2001.03.001

摘要

目的首次从人胎盘中分离纯化了天然型TIMP-3,并建立了TIMP-3酶联免疫测定方法.方法人胎盘来源的TIMP-3的纯化,首先利用4MoI/L尿素Tris缓冲液(pH8.0),在除去多数水溶性蛋白的胎盘匀浆液中提取难溶性蛋白,然后经过CM52阳离子交换树脂和Sephacryl S-200凝胶过滤二步柱层析.结果SDS聚丙酰胺凝胶电泳显示最后分离结果,分别为27KD和24KD的两务蛋白带.Westem blotting结果表明,分子量为27KD蛋白为N末端糖化的TIMP-3、分子量为24KD的蛋白为非糖化的TIMP-3、两者的比例约为1:3.对比尿素抽提液TIMP-3的纯化产率为24%,纯化倍数约为3200倍.结论纯化的天然型TIMP-3对MMP-1有明显的抑制活性.非糖化的TIMP-3 IC50为1.1×10-10M,糖化的TIMP-3IC50为1.2×10-10M,显然比重组TIMP-3对MMP-1的抑制活性要高许多(rTIMP-3的IC50为1.2×10-8M).研究表明,TIMP-3对某些肿瘤转移有明显的抑制效应.此项研究对进一步阐明MMPs和TIMPs在机体内平衡关系的改变对肿瘤浸润转移的影响作用有着重要的意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾艳	沈阳医学院生物活性物质研究所	31	235	9.0	14.0
2	王嘉伦	沈阳医学院生物活性物质研究所	24	57	5.0	6.0
3	潘晓蔚	沈阳医学院生物活性物质研究所	16	31	3.0	5.0
4	邹黎明	沈阳医学院生物活性物质研究所	20	71	4.0	8.0
5	伊德林	沈阳医学院生物活性物质研究所	15	28	3.0	5.0
6	徐军	沈阳医学院生物活性物质研究所	19	93	6.0	8.0
7	罗阳	沈阳医学院生物活性物质研究所	2	4	1.0	2.0