利用抑制消减杂交技术研究钩端螺旋体致病相关基因

• 作者: 张万江 张会东 晏菊芳 李学敏 胡昌华 鲍朗
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钩端螺旋体 基因组差异 抑制消减杂交
• 年，卷（期）: 2001,（5）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 574-577
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 字数: 4097字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2001.05.035

摘要

目的利用抑制消减杂交技术(SSH), 比较致病与非致病钩端螺旋体(简称钩体)之间基因组差异,筛选致病钩体特有的基因片段. 方法以赖型017株为tester,非致病性patocⅠ株为driver,选择合适的四碱基内切酶将基因组酶切,连接特殊设计的adaptor进行消减杂交和PCR,得到消减混合物,与T/A克隆载体连接,转化JM109建立差异消减文库,经PCR和Southern blot筛选鉴定阳性克隆,进而对部分片段进行测序和同源分析. 结果 AluⅠ适于将钩体酶切成用于SSH技术的小片段; 经SSH筛选鉴定得到30个片段大小为200～1?300bp的阳性克隆, 部分已测序的片段中1个与硫胺素合成蛋白高度同源,4个与GenBank无明显同源性,可能为赖型致病钩体所特有而非致病钩体缺失的基因片段,已被GenBank收录,收录号分别为 AF300873～300877. 结论 SSH是一种有效、灵敏、高特异的比较分析基因组差异的方法,对钩端螺旋体致病基因的筛选、基因组分化、分子遗传研究等具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	晏菊芳	华西医科大学感染免疫研究室	7	52	4.0	7.0
2	鲍朗	华西医科大学感染免疫研究室	10	73	5.0	8.0
3	胡昌华	华西医科大学感染免疫研究室	7	64	4.0	7.0
4	李学敏	华西医科大学感染免疫研究室	5	39	3.0	5.0
5	张会东	华西医科大学感染免疫研究室	8	52	4.0	7.0
6	张万江	华西医科大学感染免疫研究室	2	35	2.0	2.0