铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA分析中反应条件优化方案的探讨

• 作者: 叶明亮 王全立
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 随机扩增多态性DNA 聚合酶链反应 反应体系 反应曲面设计
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 186-190,194
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 字数: 4262字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2001.03.007

摘要

目的:筛选出反应体系的最佳优化方案及最佳扩增条件,用于铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA分析(RAPD).方法:应用单因素设计和反应曲面设计进行RAPD反应体系的优化,同时比较不同的退火温度、延伸温度及热循环仪类型对RAPD指纹图的影响.结果:单因素设计明显受到多因素间交互作用的影响,从而使优化的反应体系具有多样性;反应曲面设计得出相对稳定的优化反应体系（关键成分浓度）为：Mg2+2.0?mmol/L、引物0.5?μmol/L和模板0.5?ng/μl.退火温度以38～43℃、延伸温度以62～72℃为最佳.结论:反应曲面设计是优化RAPD反应体系的最佳方案.扩增条件中退火和延伸温度分别以38～43℃和62～72℃为最佳.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王全立	军事医学科学院野战输血研究所	126	899	16.0	25.0
2	叶明亮		31	127	6.0	10.0