木豆随机扩增多态性DNA的反应体系研究

• 作者: 李杨瑞 蒋慧萍
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 木豆 随机扩增多态性DNA 分子标记 反应体系
• 年，卷（期）: 2008,（20）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 8489-8491
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 3716字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.20.040

摘要

[目的]分析影响木豆RAPD-PCR反应中的主要因素,优化反应条件.[方法]以木豆品种ICPL87091为试材,以木豆基因组DNA为模板,通过对PCR反应体系中各种参数的优化设置,分析比较各种因素对RAPD扩增结果的影响,建立适宜的反应体系.[结果]试验得到了较为理想的适宜木豆的反应体系.优化的木豆RAPD反应务件为:模板DNA浓度30 ng,随机引物1.6 μmol/L,dNTPs(dATP,dCTP,dGTP,dTTP)各0.2 mmol/L.Mg2+浓度2.0 mmol/L,Taq 酶1.0 U,反应体积为25μl.循环体系为:先94℃l min,35℃2 min,72℃2 min,5个循环;然后94℃30 8,37℃1 min,72℃l min,35个循环;最后72℃延伸10 min.[结论]利用这一反应体系可有效地进行木豆随机扩增多态性DNA分析.极大地提高了实验结果的可重复性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李杨瑞	广西农科院广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室	29	454	11.0	20.0
2	蒋慧萍	广西农科院生物技术研究所	5	66	3.0	5.0