戊型肝炎病毒ORF2片段与ORF3嵌合重组抗原的纯化与免疫学性质

• 作者: 乐耕耘 刘勇 唐浩 孙茂盛 庄俊英 戴长柏 李春宏 杜瑞娟 马雁冰
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 戊型肝炎病毒 重组 纯化 免疫
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 页码范围: 382-385
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的考察具有多个优势抗原表位区段嵌合表达的戊型肝炎病毒(HEV)重组抗原的免疫学性质.方法将构建的含有3个不同HEV抗原表位基因ORF2.16287～6403ntORF2.26743～7126ntORF3 的表达质粒pThioHisORF2.1+2.2+3 在大肠杆菌中进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,其表达产物P2.1+2.2+3 在8mol/L尿素下经阳离子柱SPSepharoseFF层析纯化,透析复性.以P2.1+2.2+3 免疫家兔和小鼠通过ELISA检测实验动物血清及戊型肝炎患者阳性血清IgG抗体,以Western蛋白印迹检测动物免疫血清对杆状病毒系统表达的抗原片段及嵌合抗原P2.1+2.2+3 对患者阳性血清的免疫反应性.结果纯化的抗原纯度达90%以上;免疫动物血清中检测到特异性抗体的滴度分别为1∶25600(家兔)和1∶12800(小鼠)以上,抗血清能够特异识别杆状病毒系统表达的HEV抗原片段,P2.1+2.2+3 能与患者阳性血清特异反应.结论嵌合表达的HEV重组抗原P2.1+2.2+3 具有良好的免疫原性和免疫反应性,为进一步研究开发HEV诊断试剂盒及基因工程疫苗提供了基础.