猪圆环病毒2型ORF2重组蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 杨汉春 查振林 郭鑫 陈艳红 魏巍
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 猪圆环病毒2型 融合蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 9-11
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2007.11.003

摘要

利用已构建的基因工程重组菌BL21(DE3)表达猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2编码的结构蛋白,经切胶纯化后作为免疫原.采取抗原量依次递增的免疫方式免疫8周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合.间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选,有限稀释法进行亚克隆3次,最终获得4株稳定分泌抗PCV2 ORF2重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为D2A1、H4G2、B10H10和G1G2.经ELISA检测,其腹水效价分别达到1∶2.048×107、1∶2.56×106、1 ∶1.28×106、1∶2.56×106.亚型鉴定4株单克隆抗体均属IgG2a亚型,其轻链均为κ链.Western blot鉴定表明获得的4株单克隆抗体均能特异性的识别43 kD的重组PCV2 ORF2蛋白.在间接免疫荧光试验中,单抗D2A1株的反应为阴性,H4G2、B10H10和G1G2反应为阳性,表明后3株单抗能够识别天然的PCV2 ORF2蛋白表位.本试验为进一步研究PCV2ORF2基因的功能及建立快速准确的诊断PCV2的方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏巍	中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点开放实验室	6	27	3.0	5.0
2	杨汉春	中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点开放实验室	277	4554	34.0	54.0
3	郭鑫	中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点开放实验室	93	2187	24.0	44.0
4	陈艳红	中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点开放实验室	72	1205	19.0	32.0
5	查振林	中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点开放实验室	44	856	16.0	28.0