毛白杨高效转化系统的研究

• 作者: 刘根齐 杨春玲 祖国诚 赵世民
• 来源期刊: 发育与生殖生物学学报（英文版）
• 学科: 农学
• 关键词: Populous tomentosa Agrobacterium tumefaciens high frequency transformation
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 页码范围: 61-68
• 页数: 8页
• 分类号: S79
• 语种: 英文

摘要

毛白杨是一种具有多种优良特性、用途广泛并有重要经济价值的杨属树种,又是农杆菌的天然寄主植物.因此,毛白杨一直是进行木本植物组培及遗传转化研究的重要对象.本研究通过比较培养基组成(Table 1)、外植体类型(Table 2)、农杆菌侵染浓度以及预培养(Table 3&4,Fig.1)和共培养条件(Table 5)等影响农杆菌转化及植株再生效率的诸多重要条件后,建立了毛白杨的农杆菌高效转化系统.实验选用毛白杨叶片为外植体,在MS+4.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA培养基上预培养2 d后制成叶盘,并做戳伤处理,再与5×108 Cell/mL浓度的农杆菌新鲜菌液共培养2 d,然后以MS+4.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA附加50 mg/L Km和1 000 mg/LAP为筛选培养基(Table 6,Fig.4),获得最佳转化效果.2-3周后,在叶盘周围长出许多Km抗性愈伤组织,转入分化培养基分化后,再转入生根培养基3-4周,获得完整植株(Fig.3).经PCR扩增实验鉴定,转化愈伤组织的阳性率达到83.8%(Fig.2).多次重复实验结果表明,该转化系统与以往的文献报道相比,其遗传转化率大大提高.抗性愈伤组织的平均转化率高达56.2%,最终得到的再生转化植株的比率达19.9%.其中,毛白杨叶盘经戳伤处理,其转化率可提高至20～40%(Table 7).利用此转化系统我们已将免防御素NP-1广谱抗病基因成功的导入毛白杨,并获得大量的转化再生植株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵世民	中国科学院遗传研究所	14	314	9.0	14.0
2	刘根齐	中国科学院遗传研究所	20	367	13.0	19.0
3	杨春玲	中国科学院遗传研究所	2	15	1.0	2.0
4	祖国诚	中国科学院遗传研究所	1	0	0.0	0.0