人可溶性CD14基因在CHO细胞中的表达

• 作者: 宋伟 王占东 王威 王忠泽 白洁 荫俊
• 来源期刊: 白求恩医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人可溶性CD14 基因克隆 真核表达[献标识码]A[图分类号]Q785
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 232-234
• 页数: 3页
• 分类号: Q785
• 字数: 3372字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2001.03.004

摘要

目的:将人可溶性CD14重组基因,用真核表达系统进行表达,为进一步研究CD14的功能打下基础.方法:用PCR方法扩增sCD14348aa片段,将产物与载体pEF1/HisC酶切,纯化,连接后克隆至大肠杆菌DH5α中,酶切鉴定;将重组质粒pEF1/HisC/sCD14348aa用脂质体转染法转染至CHO细胞中,用SDS-PAGE、Westen-Blot方法进行检测.结果:阳性重组子可以切出1 044 bp大小的片段,得到重组质粒pEF1/HisC/sCD14348aa;转染后的CHO细胞裂解液,Westen-Blot在大小约53 000附近有一条较强的特异性棕色条带,说明sCD14348aa基因在CHO细胞中得到表达.在CD14的N端有5个潜在的糖基化位点,经真核系统表达,表达产物分子量与文献报道基本一致,证明重组蛋白糖基化完全.结论:重组质粒pEF1/HisC/sCD14在真核细胞中得到表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王占东	吉林大学第二医院妇产科	25	68	5.0	7.0
2	王忠泽		6	54	2.0	6.0
3	王威		5	54	2.0	5.0
4	宋伟		6	54	2.0	6.0
5	白洁	吉林大学第二医院妇产科	4	5	1.0	2.0
6	荫俊	吉林大学第二医院妇产科	1	1	1.0	1.0